实验教案 课程名称医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验1.1革兰氏染色 实验分组情况6组 学时数2学时 实验目的 熟悉细菌革兰氏染色的原理及在细菌鉴定中的意义 2、掌握革兰氏染色的基本操作过程 利用细菌的细胞壁组成成分和结构的不同而导致对结晶紫和碘复合物的滞 实验原理 留程度的不同，经95%乙醇溶解脱色再用石炭酸复红复染时，将待检细菌 染成呈现兰紫色的革兰氏阳性菌和呈红色的革兰氏阴性菌 设各与材料 南落平板、接种环、革兰染色液、载玻片、光学显微镜、香柏油、擦镜纸 操作重点 革兰氏染色的原理和操作方法及其在细菌鉴定中的意义 操作难点 每步染色操作的时间把握 操作注意事项做到无菌操作 教学法 启发、诱导式 实验内容、步骤、要求及时间分配 一、微生物实验室规则 10min 人身安全第一，仪器安全第二：规范操作，认真完成作业 二、显微镜油镜的使用：高倍镜向油镜转换，镜油滴加、（暗）视野查找、镜头 5min 擦洗 三、革兰氏染色细菌鉴定中的意义 5min (1)细茵细胞壁的组成 (2)细菌感染后的致病方式， (3)细菌感染的用药指导。 四、实验材料介绍： Smin 光学显微镜、革兰氏染色液、废液容器、大肠杆菌和金葡菌20r培养物 香柏油、擦镜纸、蒸馏水、吸水纸 五、染色过程（首先示教） 70min 包括涂片、初染、媒染、脱色、复染、镜检等过程，流程图如下： 结晶紫 ◆独液 →95%乙醇 复红 干燥 +镜检 六、实验报告 5min 叙述革兰氏染色过程及注意事项，绘出待检菌的者染形态并对染色结果进行 分析
实 验 教 案 课程名称 医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验 1.1 革兰氏染色 实验分组情况 6 组 学时数 2 学时 实验目的 1、熟悉细菌革兰氏染色的原理及在细菌鉴定中的意义 2、掌握革兰氏染色的基本操作过程 实验原理 利用细菌的细胞壁组成成分和结构的不同而导致对结晶紫和碘复合物的滞 留程度的不同，经 95％乙醇溶解脱色再用石炭酸复红复染时，将待检细菌 染成呈现兰紫色的革兰氏阳性菌和呈红色的革兰氏阴性菌 设备与材料 菌落平板、接种环、革兰染色液、载玻片、光学显微镜、香柏油、擦镜纸 操作重点 革兰氏染色的原理和操作方法及其在细菌鉴定中的意义 操作难点 每步染色操作的时间把握 操作注意事项 做到无菌操作 教学法 启发、诱导式 实验内容、步骤、要求及时间分配 一、微生物实验室规则 人身安全第一，仪器安全第二；规范操作，认真完成作业 二、显微镜油镜的使用：高倍镜向油镜转换，镜油滴加、（暗）视野查找、镜头 擦洗 三、革兰氏染色细菌鉴定中的意义 （1）细菌细胞壁的组成， （2）细菌感染后的致病方式， （3）细菌感染的用药指导。 四、实验材料介绍： 光学显微镜、革兰氏染色液、废液容器、大肠杆菌和金葡菌 20hr 培养物、 香柏油、擦镜纸、蒸馏水、吸水纸 五、染色过程（首先示教） 包括涂片、初染、媒染、脱色、复染、镜检等过程，流程图如下： 结晶紫 碘液 95%乙醇 复红 干燥 镜检 六、实验报告 叙述革兰氏染色过程及注意事项，绘出待检菌的着染形态并对染色结果进行 分析。 10min 5min 5min 5min 70min 5min
实验教案 课程名称 医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验1.2细茵标本片观察 实验分组情况 6组 学时数1学时 实验目的 1、进一步熟悉光学显微镜油镜的使用 2、掌拥各种细菌的基本形态和特殊结构 实验原理 标本片观察 设备与材料 常见病原细菌的标本片、光学显微镜、香柏油、擦镜纸 操作重点 光学显微镜的使用方法 操作难点 光学显微镜的使用方法 操作注意事项 观察标本的同时保护好标本片 教学法 提问式 实验内容、步是、要求及时间分阳 ·、再次介绍显微镜油镜的使用：高倍镜向油镜转换，镜油滴加、（暗）视野查5min 找、镜头清洗 40min 二、 标本片观察 1、基本形态：球 一葡萄球菌、双球菌、链球菌 杆菌一一细杆菌、粗杆菌、分支杆菌 弧南一一霍乱弧菌 2、特殊结构：单鞭毛、周身鞭毛、荚膜、芽孢 三、实验报告 5min 描绘标本片上可见常见病原菌的基本形态和特殊结构
实 验 教 案 课程名称 医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验 1.2 细菌标本片观察 实验分组情况 6 组 学时数 1 学时 实验目的 1、进一步熟悉光学显微镜油镜的使用 2、掌握各种细菌的基本形态和特殊结构 实验原理 标本片观察 设备与材料 常见病原细菌的标本片、光学显微镜、香柏油、擦镜纸 操作重点 光学显微镜的使用方法 操作难点 光学显微镜的使用方法 操作注意事项 观察标本的同时保护好标本片 教学法 提问式 实验内容、步骤、要求及时间分配 一、再次介绍显微镜油镜的使用：高倍镜向油镜转换，镜油滴加、（暗）视野查 找、镜头清洗 二、标本片观察 1、基本形态：球——葡萄球菌、双球菌、链球菌 杆菌——细杆菌、粗杆菌、分支杆菌 弧菌——霍乱弧菌 2、特殊结构：单鞭毛、周身鞭毛、荚膜、芽孢 三、实验报告 描绘标本片上可见常见病原菌的基本形态和特殊结构。 5min 40min 5min
实验教案 课程名称医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验2.1细菌的分离与培养和体表细菌检查 实验分组情况 6组 学时数0.5学时 熟悉细菌的分离与培养的原理及实际应用 实验目的 2、 掌握细菌的分离与培养的方式类型与基本操作 3、了解人体表细菌的分布 实验原理 提供细菌完成生长繁殖、新陈代谢的所需条件，以不同的方式使其能够大 量生长、 随 设备与材料 普通营养琼脂平板，液体/半固体培基，接种环/针，待检细菌的20液体 培养物，记号笔，恒温培养箱 操作重点 细菌的分离与培养的原理及实际应用 操作难点 细菌的分离与培养的方式类型与基本操作 操作注意事项 接种过程中手法要轻 教学法 启发诱导式 实验内容、步骤、要求及时间分配 复习、总结上次实验的内容和注意事项 二、细菌分离与培养的实际应用 5min (1)细茵分离、活化、培养， (2)细茵的选择、鉴定， (3)细菌的保种。 20min 三、操作过程： 1、平板一一接种环，划线“之”字形或者“井”字形： 半固体一一接种针，穿刺： 液体一一接种环针、直滴管 2、体表细菌的分离： 将唾液、汗水、 头皮屑等接种至相应培基中 3、置37℃恒温培养箱中20hr,取出观察结果。 5min 四、实验报告 叙述细菌分离培养的各种操作过程及注意事项，并对培养结果进行分析
实 验 教 案 课程名称 医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验 2.1 细菌的分离与培养和体表细菌检查 实验分组情况 6 组 学时数 0.5 学时 实验目的 1、熟悉细菌的分离与培养的原理及实际应用 2、掌握细菌的分离与培养的方式类型与基本操作 3、了解人体表细菌的分布 实验原理 提供细菌完成生长繁殖、新陈代谢的所需条件，以不同的方式使其能够大 量生长、繁殖 设备与材料 普通营养琼脂平板，液体/半固体培基，接种环/针，待检细菌的 20hr 液体 培养物，记号笔，恒温培养箱 操作重点 细菌的分离与培养的原理及实际应用 操作难点 细菌的分离与培养的方式类型与基本操作 操作注意事项 接种过程中手法要轻 教学法 启发诱导式 实验内容、步骤、要求及时间分配 一、复习、总结上次实验的内容和注意事项 二、细菌分离与培养的实际应用 （1）细菌分离、活化、培养， （2）细菌的选择、鉴定， （3）细菌的保种。 三、操作过程： 1、平板——接种环，划线“之”字形或者“井”字形； 半固体——接种针，穿刺； 液体——接种环/针、直滴管 2、体表细菌的分离：将唾液、汗水、头皮屑等接种至相应培基中 3、置 37℃恒温培养箱中 20hr，取出观察结果。 四、实验报告 叙述细菌分离培养的各种操作过程及注意事项，并对培养结果进行分析。 5min 5min 20min 5min
实验教案 课程名称 医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验2.2药敏试验 实验分组情况 6组 学时数1学时 1、熟悉细菌药敏试验的原理及其临床意义 实验目的 2、了解各种药敏试验方法 3、掌握试纸片法药敏试验的基本操作过程和结果的判定 实验原理 利用生物、化学药物可进入细菌细胞体内干扰或阻断其支持结构、核酸 玉白的合成和生物功能的发挥，从而表现出抑或杀离效 设备与材料 普通营养琼脂平板，接种环、无菌棉拭子，药敏试纸，手术镊，待检细菌 的20液体培养物，记号笔，恒温培养箱，直尺 操作重点 细菌药敏试验的原理及其临床意义 操作难点 试纸片法的基本操作过程和结果判定 操作注意事项 细菌划线的手法 教学法 启发诱导式 实验内容、步骤、要求及时间分配 、复习、总结上次实验的内容和注意事项 5min 二、细菌药敏试验的临床意义 5min (1)推论细菌细胞壁的组成、革兰氏染色的者染特性， (2)细黄感染后的致病方式和类型. (3)细茵感染的用药指导。 三、操作过程： 35min 1、用接种环或棉拭子将检细菌液体培养物无南操作均匀涂布普通营养琼脂平 板，稍置待水渗下： 2、用手术慑无菌操作按正五边形分布将药敏试纸展平后加贴于涂菌平板上 3、将平板倒置于37℃恒温培养箱培养20r,取出观察、测量结果。 四、实验报告 5min 叙述细菌药敏试验的操作过程及注意事项，并对试验结果进行分析
实 验 教 案 课程名称 医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验 2.2 药敏试验 实验分组情况 6 组 学时数 1 学时 实验目的 1、熟悉细菌药敏试验的原理及其临床意义 2、了解各种药敏试验方法 3、掌握试纸片法药敏试验的基本操作过程和结果的判定 实验原理 利用生物、化学药物可进入细菌细胞体内干扰或阻断其支持结构、核酸、 蛋白的合成和生物功能的发挥，从而表现出抑菌或杀菌效果 设备与材料 普通营养琼脂平板，接种环、无菌棉拭子，药敏试纸，手术镊，待检细菌 的 20hr 液体培养物，记号笔，恒温培养箱，直尺 操作重点 细菌药敏试验的原理及其临床意义 操作难点 试纸片法的基本操作过程和结果判定 操作注意事项 细菌划线的手法 教学法 启发诱导式 实验内容、步骤、要求及时间分配 一、复习、总结上次实验的内容和注意事项 二、细菌药敏试验的临床意义 （1）推论细菌细胞壁的组成、革兰氏染色的着染特性， （2）细菌感染后的致病方式和类型， （3）细菌感染的用药指导。 三、操作过程： 1、用接种环或棉拭子将检细菌液体培养物无菌操作均匀涂布普通营养琼脂平 板，稍置待水渗下； 2、用手术镊无菌操作按正五边形分布将药敏试纸展平后加贴于涂菌平板上； 3、将平板倒置于 37℃恒温培养箱培养 20hr，取出观察、测量结果。 四、实验报告 叙述细菌药敏试验的操作过程及注意事项，并对试验结果进行分析。 5min 5min 35min 5min
实验教案 课程名称医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验2.3生化（五糖发酵）试验 实验分组情况 6组 学时数1.5学时 熟悉细菌生化试验的原理及其临床意义 实验目的 2、 了解各种生化试验方法 3、掌握微量发酵管法基本操作过程和结果的判定 实验原理 细菌体内含有一些酶类，在新陈代谢过程中产生酸碱代谢产物或者气体， 用化学 方法可将其区 设备与材料 普通营养琼脂平板，接种针，待检细菌的20液体培养物，五糖微量发酵 管，记号笔，恒温培养箱 操作重点 细菌生化试验的原理及其临床意义 操作难点 微量发酵管法基本操作过程和结果的判定 操作注意事项液体接种细菌的方法细节 教学法 提问式 实验内容、步骤、要求及时间分配 复习、总结上次实验的内容和注意事项 15min 二、细菌生化试验的原理及其临床意义 1、原理：微生物基因组染色体编码产生的各种酶类，一类是将自身结构成份降 解进行新陈代谢，另一种是将外环境中的营养物质进行适当降解后摄 取到体内完成同化过程。这两个过程中产生的中间产物、终产物亦有 所不同。从而可人为控制培养基中微生物生长必需的碳源营养组 成，加以酸碱指示剂，接种不同微生物后，据培养液的颜色变化和 体的有无来判断改种微生物对相应营养物质的利用情况，从而推论其 是否具有相应的酶类。 5min 2、临床意义：(1)推导细菌代谢酶类的组成， (2)指导细菌的分离培养、诊断和鉴定 (3)指导了解细菌感染后可能的致病因子。 5min 三、操作过程： 1、用小砂轮环切后掰开发酵管，注意保留标签 2、用消毒好的接种针勾取细菌，小心接种于一个发酵管内，接种完毕接种针灭 35min 茵冷知 3、依次接种于其余四种糖发酵管内。 4、用胶布把五个发酵管固定好，开口向下放置于37℃温箱内过夜培养，观察 结果 5min 四、实验报告 叙述糖发酵试验的操作过程及注意事项，并对试验结果进行分析
实 验 教 案 课程名称 医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验 2.3 生化（五糖发酵）试验 实验分组情况 6 组 学时数 1.5 学时 实验目的 1、熟悉细菌生化试验的原理及其临床意义 2、了解各种生化试验方法 3、掌握微量发酵管法基本操作过程和结果的判定 实验原理 细菌体内含有一些酶类，在新陈代谢过程中产生酸碱代谢产物或者气体， 用化学方法可以将其区别 设备与材料 普通营养琼脂平板，接种针，待检细菌的 20hr 液体培养物，五糖微量发酵 管，记号笔，恒温培养箱 操作重点 细菌生化试验的原理及其临床意义 操作难点 微量发酵管法基本操作过程和结果的判定 操作注意事项 液体接种细菌的方法细节 教学法 提问式 实验内容、步骤、要求及时间分配 一、复习、总结上次实验的内容和注意事项 二、细菌生化试验的原理及其临床意义 1、原理：微生物基因组染色体编码产生的各种酶类，一类是将自身结构成份降 解进行新陈代谢，另一种是将外环境中的营养物质进行适当降解后摄 取到体内完成同化过程。这两个过程中产生的中间产物、终产物亦有 所不同。从而可人为控制培养基中微生物生长必需的碳氮源营养组 成，加以酸碱指示剂，接种不同微生物后，据培养液的颜色变化和气 体的有无来判断改种微生物对相应营养物质的利用情况，从而推论其 是否具有相应的酶类。 2、临床意义：（1）推导细菌代谢酶类的组成， （2）指导细菌的分离培养、诊断和鉴定， （3）指导了解细菌感染后可能的致病因子。 三、操作过程： 1、用小砂轮环切后掰开发酵管，注意保留标签 2、用消毒好的接种针勾取细菌，小心接种于一个发酵管内，接种完毕接种针灭 菌冷却 3、依次接种于其余四种糖发酵管内。 4、用胶布把五个发酵管固定好，开口向下放置于 37℃温箱内过夜培养，观察 结果 四、实验报告 叙述糖发酵试验的操作过程及注意事项，并对试验结果进行分析。 5min 15min 5min 5min 35min 5min