第三章基因工程载体 第一节克隆载体 第二节表达载体 第三节特殊用途载体
第三章 基因工程载体 第一节 克隆载体 第二节 表达载体 第三节 特殊用途载体
载体( Vectors) DNA 1)独立的一个包括启动子( promoter)、编码区( encoding regIon)和终止子〔 terminator)的基因,or组成基因的某 个元件,一般是不可以进入受体细胞的; 2)采用理化方法进入细胞后,也不容易在受体细胞内维持 所以,通过不同途径能将承载的外源DNA片段带入受体细胞, 并在其中得以维持的DNA分子称为基因工程载体。 Regulatory Control gene sites Structural genes Lactose operon
DNA: 1)独立的一个包括启动子(promoter)、编码区(encoding region)和终止子(terminator)的基因,or 组成基因的某 个元件,一般是不可以进入受体细胞的; 2)采用理化方法进入细胞后,也不容易在受体细胞内维持。 所以,通过不同途径能将承载的外源DNA片段带入受体细胞, 并在其中得以维持的DNA分子称为基因工程载体。 载体 (Vectors)
载体(Ve ector s 定义:在基因工程操作中,把能携带外 源DNA进入受体细胞的DNA分子叫载体 多克隆位点( multiple cloning site) MOS 复制起始点 遗传标记
➢定义:在基因工程操作中,把能携带外 源DNA进入受体细胞的DNA分子叫载体。 载体 (Vectors) 多克隆位点(multiple cloning site) ori 复制起始点 pUC 遗传标记 MCS Ampr
载体的功能 ◆运送外源基因高效转入受体细胞 ◆为外源基因提供复制能力或整合能力 ◆为外源基因的扩增或表达提供必要的条件 目的基因能否有效转入受体细胞,并在其中维持高效表达, 在很大程度上决定于载体
◆运送外源基因高效转入受体细胞 ◆为外源基因提供复制能力或整合能力 ◆为外源基因的扩增或表达提供必要的条件 载体的功能 目的基因能否有效转入受体细胞,并在其中维持高效表达, 在很大程度上决定于载体
基因工程对载体的要求 (1)在宿主细胞内能独立复制 or (2)有选择性标记Ampr、Tetr、Kanr等。 (3)多克隆位点:外源基因插入的单一限制酶位点。 (4)分子量小,可容纳较大的外源基因片段。 (5)拷贝数多,方便外源基因在细胞内大量扩增。 (6)具有对受体细胞的可转移性。 (7)具有较好的安全性,不能任意转移
(1)在宿主细胞内能独立复制,ori。 (3)多克隆位点:外源基因插入的单一限制酶位点。 基因工程对载体的要求 (7)具有较好的安全性,不能任意转移。 (2)有选择性标记 Ampr 、Tetr 、Kanr等。 (4)分子量小,可容纳较大的外源基因片段。 (5)拷贝数多,方便外源基因在细胞内大量扩增。 (6)具有对受体细胞的可转移性